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mRNA疫苗生產流程及具體步驟

更新時間:2023-02-08點擊次數:2183
mRNA疫苗生產流程及具體步驟

Step 1:將含毒的核酸序列的質粒,注入到大腸桿菌中,這里的質粒可以是從病毒中提取,但更安全有效的方法是根據發表的核酸序列優化設計直接連接到質粒上,避免跟病毒直接接觸;

Step 2:在溫暖適宜的條件下,大量繁殖生長攜帶了質粒的大腸桿菌;

Step 3:將上述生長繁殖的大腸桿菌轉移至體積更大的營養液里,適宜條件下存放發酵,使其復制億萬級別的質粒;

Step 4:發酵結束后,加入酶或者其他化學物質分解大腸桿菌細胞壁,收集并純化質粒;

Step 5:檢測上述的質粒,確保質粒攜帶的基因序列未發生變異,能夠用于后續的疫苗生產;

Step 6:加入限制性核酸內切酶,從環狀的質粒中切割出直線段的病毒基因,并除去殘留的細菌和質粒片段;

Step 7:根據“中心法則",以DNA為模板轉錄成mRNA;mRNA進入人體,其攜帶的病毒基因即可在體內翻譯出病毒蛋白,即為抗體,用于中和病毒;mRNA也需進行質量中控,確保能用于后續的疫苗生產;

Step 8:準備脂質,用于保護mRNA進入體內時不會被破壞;

Step 9:精確的控制著mRNA和脂質流速,將他們混合成脂質納米粒。


具體生產步驟如下:

步驟一:從冷庫中提取DNA

第一步生產人員會從主細胞庫中提取RNA/dna,提取后的DNA會被技術人員提取后保存在-150℃的小實驗瓶中。之后技術人員將會把解凍了的質粒注入進一批已經做了人工調整了的大腸桿菌里,從而使大腸桿菌把質粒帶入自己細胞里。通常情況下一小瓶裝滿質粒的實驗瓶能夠用來生產5000萬劑疫苗。


步驟二:成長繁殖

涵蓋了大腸桿菌以及質粒的溶液將會被裝在實驗瓶中,并且在一種溫暖無菌的琥珀色生長培養基中生長與繁殖。


步驟三:發酵混合物(細菌)

以上提到的細菌會被給予一晚的時間進行生長繁殖,然后會被轉移至營養液中存放四天,進行細菌繁殖和DNA復制。


步驟四:凈化并采集DNA

發酵過程在經歷了四天后,研究人員將會往里注入一種化學物質來分解細菌的細胞壁,隨后會凈化混合物,并且最終提取到僅留的質粒。分解細胞壁——凈化提取質粒


步驟五:質量檢測

被提取出來的質粒將會被技術人員通過和之前的樣品進行對比,以確認剛剛生產的質粒的病毒基因序列能夠被用于生產疫苗。


步驟六:質粒線性化

質粒通過質檢后,技術人員將會加入酵素進行環狀質粒切割,把病毒基因從環狀狀態切割成直線段。


步驟七:純化DNA

技術人員將會將純度已經較高的混合物進行再一次純化,用于濾出殘留的細菌或質粒片段。


步驟八:運輸

在運輸前每瓶DNA都會被冷凍、裝袋、密封,然后被放入一個裝有足夠干冰的容器里,這些容器將會被轉運到另一家工廠進行轉錄。


步驟九:進行DNA到mRNA的轉變(體外轉錄IVT)

轉運過來的DNA將會先進行解凍然后摻入由mRNA組成的部分混合,隨后酵素將會撬開DNA模板并轉化其成為mRNA。之后得到的混合物將會被移入到一個儲罐里,并且通過過濾去除雜質。


步驟十:mRNA檢測

過濾后的mRNA將會被反復測試以確保其出精度以及基因序列是否準確。


步驟十一:冷藏、打包和再次運輸

檢測后的mRNA包冷凍到零下20度,然后運到工廠。將會在那里做成疫苗,然后再把樣本運回來檢測。


步驟十二:準備mRNA

收到mRNA的包裹后,保持冷凍直到需要用時,每個包能個制造60萬瓶,360萬劑的疫苗。


步驟十三:脂質納米粒遞送系統制備(LNP)

同時,另一個步驟也在進行,準備脂質納米粒——這種物質能保護mRNA進入人體細胞時不會被破壞。


步驟十四:制作mRNA疫苗

準備好之后,通過機器精確控制mRNA和脂質,將他們混合成脂質納米粒,形成疫苗顆粒。


步驟十五:準備疫苗瓶

清洗和高溫消毒疫苗瓶,13部高速攝像機在盯著流水線,每一個瓶子都要拍超過100張照片,有裂縫、碎片和其他問題的瓶子,將會迅速從生產線篩選出去。


步驟十六:罐裝疫苗

機器將0.45毫升疫苗注射到一個瓶子,稀釋后,成為6個劑量的疫苗。生產線每分鐘能包裝575個瓶子。


步驟十七:打包、冷藏和測試

灌注完的疫苗經過檢查,貼上標簽,然后放進盒子里打包。所有盒子要再冷凍數天,降溫到零下70℃的極冷溫度。與此同時,該批次的疫苗要送去做檢測。


步驟十八:打包和運輸成品疫苗

數周的測試后,合格的疫苗可以運輸了。盒子里裝上了溫度計,實時監測溫度是否達標。每個盒子里有45磅的干冰。

聯系方式

0512-62956104

(全國服務熱線)

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